Les levuresPoint sur la culture sur gelose

Saccharomyces chéries... cerevisiae, carsbergensis, bruxellensis, ...
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Nezahualcoyotl
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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par Nezahualcoyotl »

Thierryj a écrit :Polypropylène, malheureusement. Où en acheter en verre ?
Chez les bons fourniseurs de laboratoire....
Sinon, , si le sachet a été conservé proprement, tu peux toujours couler ta gélose et de plus , une fois prise la repasser sous la flamme d'un bec buzen.


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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par brasseriemontoise »

Nezahualcoyotl a écrit :
Thierryj a écrit :Merci pour ce post très instructif.

Ce qui est possible de faire est de stériliser ton mélange agar plus moût dans une bouteille ( bouchon légèrement ouvert ) avec ton autocuiseur , 20 minutes à 120 °C et une fois le cycle fini, de refermer la bouteille . La gélose sera liquéfiée au micro-onde et coulée dans des boites avant utilisation.

Nezahaulcoyotl, gélifié
La je dis attention !!!! Pour l'avoir vecu...
J'avais egalement préparé une gelose en bouteille (verre Duran) puis refermée. Pas de problème jusqu'au jour ou un petit commique a ouvert la bouteille juste pour voir ce que c'était et l'a refermé ! une semaine plus tard, la bouteille explosait et les murs étaient immaculés de gélose. Heureusement il n'y avait personne dans la piece a ce moment là car c'était une vrai bombe !!! Il y avait donc eu contamination, développement bactériens, dégagement de C02 = surpression et BOUM !
Maintenant, je ne sert plus les bouchon et préfère une bourre d'ouate de coton pour fermer la bouteille.

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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par Nezahualcoyotl »

brasseriemontoise a écrit :
Nezahualcoyotl a écrit :
Thierryj a écrit :Merci pour ce post très instructif.

Ce qui est possible de faire est de stériliser ton mélange agar plus moût dans une bouteille ( bouchon légèrement ouvert ) avec ton autocuiseur , 20 minutes à 120 °C et une fois le cycle fini, de refermer la bouteille . La gélose sera liquéfiée au micro-onde et coulée dans des boites avant utilisation.

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La je dis attention !!!! Pour l'avoir vecu...
J'avais egalement préparé une gelose en bouteille (verre Duran) puis refermée. Pas de problème jusqu'au jour ou un petit commique a ouvert la bouteille juste pour voir ce que c'était et l'a refermé ! une semaine plus tard, la bouteille explosait et les murs étaient immaculés de gélose. Heureusement il n'y avait personne dans la piece a ce moment là car c'était une vrai bombe !!! Il y avait donc eu contamination, développement bactériens, dégagement de C02 = surpression et BOUM !
Maintenant, je ne sert plus les bouchon et préfère une bourre d'ouate de coton pour fermer la bouteille.

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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par Thierryj »

Pour les Dijonnais-es et alentours, ce fournisseur est ouvert aux particuliers

http://www.verry.fr/

Merci pour vos si promptes réponses
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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par leurne »

Je up ce sujet et rajoute ce lien:

viewtopic.php?f=52&t=10344&hilit=glycerol

A plussoier d'urgence ;)

(On sent que je viens de commander une levure liquide que je compte garder? hehe ;)
et pis j'vais profiter de mon statut d'étudiant pour piquer du matos à l'école, ou squatter les labos! hihihi!)
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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par nawack38 »

salut,
je déterre ce sujet car il me vient soudain une question con... je me lance actuellement dans la culture de nos chère levure. j'ai rassemblé pas mal de matos, notamment boites de pétri et tube à vis, etc. Or, ces derniers sont en Polypropylène.
ce que je lis plus haut me pousse à penser que l'on ne peut pas les stériliser! Moi je pensais les passer à la cocotte minute avant de m'en servir mais du coup je ne sais plus trop... quelqu'un pour m'éclairer?
On parle aussi de passer le couvercle de la boite de pétri rapidement à la flamme du bunsen, j'imagine que c'est valable uniquement pour les boites en verre... :?
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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par Catuvolcos »

Salut !

Normalement, tu devrais pouvoir les autoclaver sans problème (bouchon non serré). Pour cela le plus simple est de les rassembler dans un pot de confiture que tu mets dans ta cocotte minute. Tu n'ouvres le pot que quand tu es près d'une flamme de brûleur ça permet de les garder stériles. On faisait ça dans un labo où je travaillais pour les tubes Eppendorf, ça marchait bien.

Mais sinon, normalement les cryotubes vissés sont stérilisés et fermés, donc si tu les as pas ouverts/manipulés en conditions non stériles ça peut être utilisé tel quel
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Nezahualcoyotl
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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par Nezahualcoyotl »

nawack38 a écrit :salut,
je déterre ce sujet car il me vient soudain une question con... je me lance actuellement dans la culture de nos chère levure. j'ai rassemblé pas mal de matos, notamment boites de pétri et tube à vis, etc. Or, ces derniers sont en Polypropylène.
ce que je lis plus haut me pousse à penser que l'on ne peut pas les stériliser! Moi je pensais les passer à la cocotte minute avant de m'en servir mais du coup je ne sais plus trop... quelqu'un pour m'éclairer?
On parle aussi de passer le couvercle de la boite de pétri rapidement à la flamme du bunsen, j'imagine que c'est valable uniquement pour les boites en verre... :?
Comme te le signalait Catuvolcos, ces tubes peuvent parfaitement être autoclavés ( 120°C 20 min, en milieu humide ). cependant, si ces tubes t'ont été donné fermés avec leur bouchon, l’intérieur est propre et stérile. Donc , nulle nécéssité de les autoclaver préalablement.
Idem pour les boites de Pétri, dans leur emballage , elles sont stériles ( rayon gamma pour le polycarbonate ou le polystyrène ) . Après l'ouverture du sachet auprès de la flamme, tu refermes le sachet à l'aide d'un adhésif. Là encore , nul besoin de passer le couvercle à la flamme. Il s'agit de vieux réflexe datant de l'époque de l'instrumentation en verrie classique.

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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par SebC »

Salut, le sujet est vieux dsl
Il existe également des techniques de stérilisation basse température (chercher tyndalisation)
En gros le principe c'est de chauffer 2 ou 3 fois à 24h d'intervalle à une température de 70,80 degré pendant 30min
Du coup si tes boîtes de Petri ne supporte pas les températures très élevées tu peux utiliser cette technique.
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Re: Point sur la culture sur gelose

Message par otakémémé »

Intéressant ce sujet!